|
За время выполнения гранта полностью построен, оснащен и заработал в полном объеме Международный научно-исследовательский, клинико-образовательный центр регенеративной медицины. Отобранные по конкурсу молодые исследователи прошли обучение, стажировки в ведущих научных центрах России и Европы и начали самостоятельные исследования. На базе созданного центра получены важные научные результаты в изучении молекулярных механизмов регенерации, также касающиеся разработки новых протоколов децеллюляризации и рецеллюляризации органов, изучения свойств децеллюляризованных матриксов различных органов и тканей. Разработаны: Протокол международного исследования «Трансплантация трахеи» (протокол, брошюра исследователя, информированное согласие, регистрационная карта, сертификаты материалов), Технические условия «Засеивание нанокомпозитного каркаса аутологичными мононуклераными клетками костного мозга». Начат трансфер полученных результатов в клинику. За время выполнения гранта в клинической базе Центра – Краевой клинической больнице №1 -выполнены 4 трансплантации трахеи (одна из них – трахеи и части гортани проведена впервые в мире) с использованием нанокомпозитных каркасов, засеянных собственными клетками пациентов, выделенными из костного мозга. Все работы по подготовке, засеиванию, тестированию каркаса, выполнены полностью исследователями гранта, прошедшими стажировку в Каролинском институте. Зарегистрирована заявка на патент устройства «Биореактор для проведения децеллюляризации/рецеллюляризации диафрагмы крысы».
Основные результаты:
-
База данных литературных источников в области регенеративной медицины (490). (При подготовке использованы следующие базы данных: http://www.jcbi.ru/baza/index.shtml, Bioinformatics Links Directory, Электронная библиотека GeneExpress-2.1, базы данных, включающие данные о метаболических генных сетях: KEGG, MetaCyc, TRANSPATH, BioCarta Pathways, GeNet, PubMed);
-
Аналитический обзор научно-технической литературы в области регенеративной медицины, существующих и описанных методов создания тканей и органов, руководств, парадигм и возможностей;
-
Аналитический обзор результатов сравнительного анализа и развития различных подходов для определения оптимальных методов децеллюляризации тканей и органов, засеивания каркасов (натуральных и синтетических), определения оптимальных источников клеток для тканевой инженерии респираторных органов, выбора материалов для создания каркаса тканеинженерного органа;
-
Аналитический обзор литературы по методам исследования процессов выделения клеток, их дифференцировки, пролиферации, размножения, создания клеточных линий, экспрессии генов в процессе дифференцировки стволовых клеток, взаимодействия с различными каркасами (натуральными и синтетическими), децеллюляризации тканей и органов, использованию биореакторов;
-
Методические рекомендации по ведению экспериментов in vitro, описание предлагаемых подходов с оценкой их преимуществ по сравнению с существующими и описанными;
-
Технические условия: «Протокол децеллюляризации диафрагмы крысы»;
-
Технические условия: «Протокол децеллюляризации сердца крысы»;
-
Технические условия: «Протокол децеллюляризации мозга крысы»;
-
Технические условия: «Протокол децеллюляризации трахеи крысы»;
-
Техническое задание: «Разработка тканеинженерной диафрагмы на модели крысы»;
-
Техническое задание: «Разработка тканеинженерного сердца на модели крысы»;
-
Технические условия: «Протокол децеллюляризации легкого крысы»;
-
Технические условия: «Методика проведения биомеханических исследований децеллюляризированных матриксов различных органов и тканей (сердца, диафрагмы, легких);
-
Технические условия: «Методика определения физиологических параметров при проведении децеллюляризаци легкого с использованием биореактора»;
-
Технические условия: «Протокол рецеллюляризации диафрагмы крысы с использованием криосрезов»;
-
Технические условия: «Протокол рецеллюляризации диафрагмы крысы с использованием децеллюляризированного матрикса»;
-
Технические условия: «Протокол рецеллюляризации сердца крысы с использованием криосрезов»;
-
«Протокол рецеллюляризации естественного каркаса сердца крысы»;
-
Устройство: «Биореактор для проведения децеллюляризации/рецеллюляризации диафрагмы крысы»;
-
«Протокол выделения ММСК из костного мозга крысы»;
-
«Протокол адипогенной, остеогенной, хондрогенной стимуляции ММСК при использовании стандартных стимулирующих сред»;
-
«Протокол хондрогенеза в культуре ММСК in vitro в условиях стимулирующего воздействия ростовыми факторами»
-
Протокол международного исследования «Трансплантация трахеи» (протокол, брошюра исследователя, информированное согласие, регистрационная карта, сертификаты материалов);
-
Технические условия «Засеивание нанокомпозитного каркаса аутологичными мононуклераными клетками костного мозга»;
-
Техническое решение: «MTT-тест с использованием засеянных собственных мононуклеарных клеток пациента на нанокомпозитном каркасе в биореакторе»;
-
Техническая документация «Протокол ведения больного и описание операции по трансплантации трахеи;
-
Техническая документация «Протокол ведения больного и описание операции по трансплантации трахеи гортани»;
-
Регистр и база данных пациентов-кандидатов на трансплантацию;
-
Проведение трансплантаций биоинженерной трахеи и трахеи и части гортани пациентам в рамках клинических исследований (4);
-
«Методика проведения биомеханических исследований децеллюляризированных матриксов легких низшего примата»;
-
«Методика проведения биомеханических исследований децеллюляризированных матриксов сердца низшего примата»;
-
«Методика проведения биомеханических исследований децеллюляризированных матриксов диафрагмы низшего примата»;
-
«Протокол получения децеллюляризированного матрикса диафрагмы низшего примата»;
-
«Протокол получения децеллюляризированного матрикса сердца низшего примата»;
-
«Протокол получения децеллюляризированного матрикса легких низшего примата»;
-
«Система контроля процесса децеллюляризации биоинженерного каркаса»;
-
«Протокол выделения, культивирования, изучения пролиферативных и адгезивных свойств мезенхимальных мультипотентных стромальных стволовых клеток (ММСК) крыс, типирование клеток с использованием селективных маркеров»;
-
«Протокол адипогенной, хондрогенной и остеогенной дифференцировки ММСК крысы»;
-
«Протокол выделения, культивирования, изучения пролиферативных и адгезивных свойств мезенхимальных мультипотентных стромальных стволовых клеток (ММСК) низших приматов, типирование клеток с использованием селективных маркеров»;
-
«Протокол адипогенной, хондрогенной и остеогенной дифференцировки ММСК низших приматов»;
-
«Протокол статичной рецеллюляризации децеллюляризированных матриксов сердца, легких и диафрагмы низших приматов аллогенными ММСК с последующей оценкой их жизнеспособности»
-
«Протокол рецеллюляризации легкого крысы с использованием децеллюляризированного матрикса в биореакторе»;
-
«Проведение гетеротопической трансплантации (подкожные тесты) децеллюляризированных матриксов диафрагмы крысе»;
-
«Проведение гетеротопической трансплантации (подкожные тесты) децеллюляризированных матриксов сердца крысе»;
-
«Проведение гетеротопической трансплантации (подкожные тесты) децеллюляризированных матриксов легкого крысе»;
-
«Протокол проведения спирометрии мелким лабораторным животным (крысы) для оценки функциональных свойств дыхательной системы после трансплантации тканеинженерной диафрагмы»;
-
«Исследование стабильности биомеханических свойств синтетических матриксов при рецеллюляризации»;
-
«Протокол рецеллюляризации синтетических каркасов ММСК крысы костномозгового происхождения»;
-
«Протокол рецеллюляризации синтетических каркасов МНК крови человека»;
-
«Протокол оценки жизнеспособности клеток на предварительно рецеллюляризированных синтетических каркасах»;
-
«Протокол моделирования острого инфаркта миокарда»;
-
«Протокол верификации острого инфаркта миокарда на крысе»;
-
«Протокол моделирования легочной гипертензии на крысе»;
-
«Процедура ИФА IL – 1a», «Процедура ИФА IL – 1b», «Процедура ИФА IL – 4», «Процедура ИФА IL – 6», «Процедура ИФА IL – 17A», «Процедура ИФА TNF – a», «Процедура ИФА TNF – y», «Процедура определения С – реактивного белка ИФА».
|
|